- 顾昕;陈东芹;潘半舟;王锐;黄佳圆;黄桂春;陈龙邦;
目的探讨自噬对人肺腺癌细胞放疗敏感性的影响。方法采用透射电镜和荧光显微镜检测亲本人肺腺癌细胞SPC-A1和耐药细胞SPC-A1/DTX放疗前后的自噬活性。应用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理经射线照射后的细胞,应用Western blotting检测自噬相关蛋白标志物LC3、p62和Beclin-1蛋白表达的变化,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布变化。四甲基偶氮唑盐和克隆形成实验分别检测抑制自噬后细胞生存和增殖能力的改变情况。结果化疗耐药的人肺腺癌耐多西他赛细胞SPC-A1/DTX比亲本细胞更耐受放疗,接受相同放疗剂量后增殖能力更强;前者较后者自噬小体较多、带绿色荧光蛋白标签的LC3荧光密度明显增多,自噬相关蛋白标志物表达更加明显(P<0.05)。放射线同时可引起两种细胞株自噬水平的增高。自噬抑制剂3-MA预先处理耐药细胞并接受放疗后,可显著抑制自噬标志物LC3和Beclin-1,上调p62表达(P<0.05),并降低SPC-A1/DTX细胞的生存和增殖能力,放射敏感的G2/M期细胞比例和凋亡率增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论自噬为SPC-A1/DTX细胞耐受放射治疗提供了一个自我保护的机制。自噬能够增强人肺腺癌耐多西他赛细胞的放疗抵抗,而抑制自噬有可能是逆转人肺腺癌细胞放、化疗耐受的一个策略。
2015年04期 v.20;No.160 289-295页 [查看摘要][在线阅读][下载 603K] - 孙荣;高舒;华海清;杨爱珍;秦叔逵;
目的观察人参皂苷Rg3、索拉非尼、奥沙利铂单药及联合对裸鼠人肝癌细胞移植瘤血管生成的作用并探讨其可能机制。方法以裸鼠人肝癌转移模型LCI-D20为观察对象,将60只荷瘤裸鼠随机分成8组,分别为人参皂苷Rg3组(A组)、奥沙利铂组(B组)、索拉非尼组(C组)、人参皂苷Rg3+索拉非尼组(D组)、人参皂苷Rg3+奥沙利铂组(E组)、奥沙利铂+索拉非尼组(F组)、人参皂苷Rg3+奥沙利铂+索拉非尼组(G组)和生理盐水对照组(H组)。肿瘤接种第11 d后开始给药,人参皂苷Rg3 5 mg/kg(1天1次)、奥沙利铂5 mg/kg(2天1次),均用腹腔注射,索拉非尼30 mg/kg(1天1次)灌胃。给药14 d后处死裸鼠,剥离瘤体,检测各组瘤组织中微血管密度(MVD),免疫组化染色和Western blotting检测各组瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子(HIF)-1α和VEGF受体(VEGFR)-2的表达。结果与H组比较,其余各组MVD均较低(P<0.01),VEGF蛋白阳性表达率均较低(P<0.05),HIF-1α蛋白阳性表达率均下降,但差异无统计学意义(P>0.05);A组、D组、E组的VEGFR-2蛋白阳性表达率显著低于H组(P<0.05)。与H组比较,仅A组、B组、C组、D组、E组能显著下调瘤组织中VEGF、HIF-1α和VEGFR-2蛋白的表达(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3具有一定的抗血管生成作用,其机制可能与下调VEGF、HIF-1α、VEGFR-2及MVD的表达有关。人参皂苷Rg3分别与索拉非尼、奥沙利铂联合可以增强抗血管生成作用,但三药联合时抗血管生成作用反而减弱,提示可能存在其他抗肿瘤机制,值得进一步研究。
2015年04期 v.20;No.160 296-302页 [查看摘要][在线阅读][下载 430K] - 周群芳;段琬璐;黎国峰;严飞;刘锐洪;李叶阔;
目的研究IR-780光热治疗对小鼠乳腺癌移植瘤的治疗效果。方法在BALB/c小鼠右侧腹部皮下接种4T1乳腺癌细胞建立荷瘤动物模型进行实验,将荷瘤小鼠随机分为对照组(瘤内注射0.1 ml生理盐水)、激光组(激光照射2.2W/cm2,4 min)、IR-780组(瘤内注射80μg IR-780溶液)和IR-780+激光组(瘤内注射80μg IR-780溶液,激光照射2.2 W/cm2,4 min)。游标卡尺测量并计算肿瘤体积,采用Vevo 2100超高分辨率小动物超声成像仪对4组小鼠给药后0、12及60 h的肿瘤组织进行成像并采图,采用免疫组化TUNEL法分析各组治疗60 h后肿瘤组织的凋亡指数。结果 IR-780+激光组治疗60 h后的肿瘤体积较其余3组均减小(P<0.05);与治疗前相比,IR-780+激光组治疗12、60 h后的肿瘤组织超声回声灰阶值均降低(P<0.05),且均低于其余3组(P<0.05);与其余3组比较,IR-780+激光组的肿瘤凋亡指数升高(P<0.05);对照组、激光组和IR-780组肿瘤体积、超声回声及凋亡指数的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 IR-780光热治疗对小鼠乳腺癌肿瘤具有明显杀伤作用,表现为肿瘤体积明显减小,肿瘤回声明显减低及大量肿瘤细胞凋亡。
2015年04期 v.20;No.160 303-306页 [查看摘要][在线阅读][下载 186K] - 李爱明;赵惠民;揭俊卿;
目的探讨Melittin对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响。方法分别采用0、10、20、50、100μmol/L Melittin处理NSCLC细胞株A549、SPC-A1及人肺上皮细胞株16HBE 24、48、72和96 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测各细胞株的增殖抑制率变化,同时采用流式细胞术Annexin-FITC/PI双染法及PI单染法检测不同浓度Melittin处理24、48 h后的A549细胞凋亡及细胞周期情况,Western blotting检测不同浓度Melittin处理48 h后的A549细胞中PI3K/Akt信号通路相关蛋白(Akt和PTEN)及凋亡促进基因(caspase-9)的表达情况。结果在10~100μmol/L范围内,Melittin可呈剂量和时间依赖的方式提高A549、SPC-A1细胞的增殖抑制率,差异均有统计学意义(P<0.05),但对16HBE无细胞毒性作用(P>0.05);与0μmol/L比较,除10μmol/L Melittin处理24 h后的晚期凋亡率和G2/M期细胞比例无统计学差异(P>0.05),10~100μmol/L的早、晚期凋亡率、G0/G1期细胞比例及PTEN和caspase-9蛋白水平均升高,S期、G2/M期细胞比例及Akt水平均降低,以上差异有统计学意义(P<0.05),且10~100μmol/L范围内各浓度间的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Melittin可对NSCLC细胞有毒性作用,但对正常肺上皮细胞无影响,且可诱导A549细胞凋亡及细胞周期阻滞并抑制PI3K/Akt信号通路的激活。
2015年04期 v.20;No.160 307-311页 [查看摘要][在线阅读][下载 225K] - 沈园园;杜瀛瀛;袁媛;潘跃银;
目的探讨辛伐他汀(SVA)体外对乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用及其可能的机制。方法选用人乳腺癌MCF-7细胞进行体外培养,采用四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度SVA(0、3.25、6.25、12.5、25、50和100μmol/L)处理MCF-7细胞24、48、72 h后的增殖抑制作用,荧光染色法观察SVA(0、2和4μmol/L)处理MCF-7细胞48 h后的凋亡形态学变化,流式细胞仪测定SVA(0和4μmol/L)处理MCF-7细胞48 h后的细胞周期变化,免疫印迹法分析SVA(0、2、4和8μmol/L)处理MCF-7细胞72 h后细胞内Bcl-2和Bax蛋白水平的表达。结果不同浓度SVA处理不同时间后,MCF-7细胞的增殖明显受到抑制,且增殖抑制作用呈时间和浓度依赖性;荧光显微镜观察发现SVA能够诱导MCF-7细胞出现核固缩、染色质凝集等凋亡形态学改变。流式细胞仪检测细胞周期显示,SVA阻滞MCF-7细胞于G0/G1期。免疫印迹结果显示,SVA处理组的Bcl-2蛋白表达水平低于对照组,Bax蛋白表达水平明显高于对照组,且随SVA浓度的增高,Bcl-2蛋白水平逐渐降低,Bax蛋白水平逐渐升高。结论 SVA对人乳腺癌MCF-7细胞具有增殖抑制作用,且呈浓度和时间依赖性,其抗肿瘤机制可能与诱导细胞周期阻滞、下调Bcl-2蛋白及上调Bax蛋白表达有关。
2015年04期 v.20;No.160 312-316页 [查看摘要][在线阅读][下载 201K] - 王树香;陈秀玮;李雪婷;张瑜;尚盼;高雅;
目的探讨再生基因Ⅳ(RegⅣ)在子宫内膜癌、不典型增生子宫内膜及正常子宫内膜组织中的表达情况,并分析RegⅣ与子宫内膜癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测138例子宫内膜癌组织、25例不典型增生子宫内膜组织、31例正常子宫内膜组织中RegⅣ蛋白的表达,并分析其表达与子宫内膜癌临床病理特征及预后的关系。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,采用Cox回归模型分析影响子宫内膜癌预后的独立因素。结果 RegⅣ在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜、子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为9.7%(3/31)、32.0%(8/25)和60.1%(83/138),差异有统计学意义(P<0.05)。RegⅣ表达与子宫内膜癌患者的年龄、病理分期、组织学分级、肌层浸润深度及淋巴结转移相关(P<0.05),而与病理类型无关(P>0.05)。Cox多因素分析显示,RegⅣ表达是影响子宫内膜癌患者无病生存期的独立因素(P<0.05)。结论 RegⅣ可能在子宫内膜癌的发生、发展中起一定作用,并指导预后的评估。
2015年04期 v.20;No.160 317-321页 [查看摘要][在线阅读][下载 199K] - 戴宏宇;李苏宜;马国栋;万明月;喻存俊;陈文萍;
目的探讨Ⅲ型β-微管蛋白(TUBB3)和微管相关蛋白tau(MAPT)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达水平及其对紫杉类化疗药物敏感性的预测价值。方法收集55例未经化疗的不能手术的转移性或复发晚期NSCLC患者的肿瘤组织标本,一线治疗均采用铂类联合紫杉类双药化疗方案,2个周期后评估疗效,将完全缓解和部分缓解的患者归为敏感组,疾病稳定的患者归为次敏感组,疾病进展的患者归为耐药组。采用逆转录-聚合酶链反应检测3组TUBB3和MAPT的mRNA水平,分析NSCLC组织中TUBB3和MAPT mRNA的相关性,采用免疫组织化学法检测3组TUBB3和MAPT的蛋白表达情况。结果在55例NSCLC组织中,TUBB3和MAPT mRNA在3组均有不同程度的表达,且两者蛋白均定位在细胞质内。敏感组、次敏感组及耐药组的TUBB3 mRNA水平分别为0.12±0.13、0.17±0.24和0.51±0.19,MAPT mRNA水平分别为0.09±0.05、0.14±0.09和0.46±0.21,TUBB3阳性表达率分别为22.22%(4/18)、20.00%(5/20)和70.59%(12/17),MAPT阳性表达率分别为16.67%(3/18)、25.00%(4/20)和52.94%(9/17);耐药组的TUBB3和MAPT mRNA水平及阳性率均高于其余两组(P<0.05),且敏感组和次敏感组的以上差异均无统计学意义(P>0.05)。TUBB3和MAPT的mRNA水平呈正相关(r=0.219,P=0.047)。结论 TUBB3和MAPT的mRNA和蛋白表达与紫杉类药物的敏感性有关,高表达者提示对紫杉类药物耐药,联合检测TUBB3和MAPT可能对紫杉类药物化疗敏感性具有较好的预测价值。
2015年04期 v.20;No.160 322-326页 [查看摘要][在线阅读][下载 144K] - 胡赛男;俞乔;胡亦钦;袁渊;高津;张莉莉;
目的比较EC序贯P剂量密集方案与TEC方案在乳腺癌新辅助化疗中的疗效和不良反应。方法对2011年2月至2012年8月收治的64例Ⅱa期~Ⅲc期乳腺癌新辅助化疗患者进行回顾性分析,根据化疗方案分为剂量密集组(31例)和TEC组(33例),术前分别接受3~8个周期EC序贯P剂量密集方案和2~6个周期TEC方案新辅助化疗。密集方案:E(表阿霉素)90 mg/m2d1,联合C(环磷酰胺)600 mg/m2d1,每14天为1周期,共4个周期,序贯至P(紫杉醇)175 mg/m2d1,每14天为1周期,共4个周期。TEC方案:T(多西紫杉醇)75 mg/m2d1,E 70 mg/m2d1,C 600 mg/m2d1,每21天为1周期。按照实体瘤的疗效评价标准(RECIST)1.1和术后病理组织学结果评定疗效,按照不良事件常用术语评定标准4.0版(CTCAE 4.0)评价不良反应。结果全组64例患者均可评价疗效。剂量密集组和TEC组的病理完全缓解率分别为16.1%和12.1%,有效率分别为80.6%和66.7%,两组的病理完全缓解率和有效率的差异无统计学差异(P>0.05);剂量密集组和TEC组的1、2年无病生存率分别为93.5%、86.7%和93.9%、81.8%,1、2年总生存率分别为100.0%、90.3%和100.0%、85.8%,且两组无病生存率和总生存率的差异均无统计学差异(P>0.05);TEC组3~4级中性粒细胞下降的发生率高于剂量密集组(6.4%vs.33.3%,P=0.012),剂量密集组1~2级神经毒性(80.6%vs.36.4%,P<0.001)和肌肉关节酸痛(67.7%vs.30.3%,P=0.005)的发生率均高于TEC组。结论剂量密集EC序贯P新辅助化疗方案与TEC方案疗效相似,毒副反应可以耐受,但安全性更好,有延长无病生存期和总生存期的趋势,是新辅助化疗的优选方案。
2015年04期 v.20;No.160 327-332页 [查看摘要][在线阅读][下载 158K] - 陈慧;莫淋;徐晓帆;顾军;
目的探讨影响雌激素受体(ER)阳性乳腺癌患者预后的因素。方法收集2006年1月至2009年11月诊治的229例ER阳性乳腺癌患者的临床和随访资料,分析其临床病理参数中与预后相关的因素。将发病年龄、月经状况、肿瘤大小、淋巴结转移率(LNR)、PR表达、Her-2表达、组织学分级、新辅助化疗及放疗等因素进行Kaplan-Meier单因素和Cox回归多因素生存分析。结果获随访的223例患者的复发率为15.70%。Cox模型多因素生存分析显示:肿瘤大小、LNR、Her-2表达及PR表达均为影响ER阳性患者接受内分泌治疗后无复发生存的独立因素(P<0.05)。结论肿瘤越大、Her-2过表达、PR阴性及LNR较高是ER阳性乳腺癌复发转移的独立危险因素。
2015年04期 v.20;No.160 333-337页 [查看摘要][在线阅读][下载 143K] - 姚娟;王建军;王海燕;余波;石群立;章如松;王璇;周晓军;王建东;
目的探讨肺腺癌组织中甲状腺转录因子-1(TTF-1)和表皮生长因子受体(EGFR)表达及两者与EGFR第19、21号外显子突变间的关系。方法收集153例手术及穿刺活检肺腺癌标本并采用免疫组化法检测TTF-1和EGFR蛋白表达;采用扩增阻滞突变系统(ARMS)法检测EGFR基因第19和21号外显子突变,并分析TTF-1、EGFR表达和EGFR突变三者间的关系。结果 153例肺腺癌组织中,EGFR突变68例,其中32例为第19号外显子,36例为21号外显子;TTF-1表达(0~+)、(++)、(+++)分别为48例、40例、65例,其对应标本的EGFR(+++)表达率依次为50.0%(24/48)、62.5%(25/40)和83.1(54/65),EGFR突变率依次为25.0%(12/48)、37.5%(15/40)和63.1%(41/65);EGFR表达(0~+)、(++)、(+++)分别为18、32、103例,其对应标本的EGFR突变率分别为16.7%(3/18)、34.4%(11/32)和52.4%(54/103)。随TTF-1表达增强,EGFR表达和EGFR突变率亦相应增加,呈正相关(r=0.940,0.916;P均<0.05),差异有统计学意义(P<0.05);随EGFR表达增加,EGFR突变率亦相应增加,呈相关性(r=1.000),差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺腺癌中TTF-1、EGFR表达与EGFR第19和21号外显子突变三者间存在相关性,检测TTF-1表达可以用于肺腺癌靶向治疗的预筛,在急需要化疗/靶向治疗而EGFR突变检测难以实施的地区,可通过联合检测TTF-1、EGFR蛋白来预测EGFR基因突变情况,以指导及时有效的临床诊断和治疗。
2015年04期 v.20;No.160 338-342页 [查看摘要][在线阅读][下载 196K] - 张博;司芩;钱晓莉;黄声稀;杨璐;刘媛媛;
目的探讨实时超声造影和增强MRI在肝外胆管癌影像学特征。方法回顾性分析对比2009年1月至2013年12月我院收治经手术病理证实的56例肝外胆管癌患者超声造影和增强MRI的影像学特征。结果超声造影显示肝外胆管癌动脉期多为高增强(37/56,66.0%),门脉期(50/56,89.3%)及延迟期(56/56,100%)以回声减低为主;达峰值时,56个病灶中增强不均匀34个,增强均匀22个;增强MRI显示动脉期多为高增强(37/56,66.0%),门脉期一半以上为等增强(29/56,51.7%),延迟期以等增强(17/56,30.3%)或高增强(33/56,58.9%)为主;达峰值时,56个病灶中增强不均匀39个,增强均匀17个。肝外胆管癌超声造影动脉期显示不同增强水平的病灶数与增强MRI比较差异无统计学意义(P>0.05);超声造影门脉期及延迟期与增强MRI增强水平显示的病灶数比较差异有统计学意义(P<0.05);肝外胆管癌中超声造影与增强MRI显示增强均匀性的病灶数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论对临床上高度怀疑肝外胆管癌患者,超声造影可作为增强MRI有益补充,为肝外胆管癌的诊断提供重要的影像学依据。
2015年04期 v.20;No.160 343-346页 [查看摘要][在线阅读][下载 141K]